无病苗木的培育是指无柑橘黄龙病等病害的苗木培育，要求用无病毒母本树的接穗和砧木进行繁殖，对柑橘黄龙病等病害的防治有重要意义。

一、母本树的选择与鉴定

采穗用的母本树特性要求也是专用母本园种植的具有春甜橘固有丰产稳产性能、种性典型纯正、综合性状优良、无病虫害的健壮良种母树。为确保苗木不带病，培育无病苗木所用的母树应当栽植于纱网大棚内，并经常进行鉴定。病毒鉴定可通过农业部指定的果树脱毒中心进行，如设立在广东农业科学院果树研究所的华南热带果树脱毒中心。母本树的栽培管理要按照无病程序进行，及时淘汰变异植株。一般为了保证接穗不发生变异，原则上每株采穗用的母本树采穗时间不超过3年。

二、无病苗木的培育

1.育苗基地

育苗基地包括无病毒采穗圃、指示植物鉴定圃和无病毒苗圃。无病苗木的培育主要运用纱网大棚等设施进行，要求无昆虫传播病害，整个育苗过程完全在封闭的纱网大棚内完成。如果采用露地育苗，要求有良好的自然隔离条件，有高山、大河、湖泊等自然隔离屏障，周围2千米以上无芸香科类植物。

2.无病苗木的培育

无病苗木一般采用营养筒(袋)等容器育苗或露地育苗，比常规大田育苗要求更高。

(1)培育砧木

①砧木种子的采集和消毒：砧木种子要采自优良纯正品种或优良单株系，无检疫性病虫害。播前要进行种子消毒，先在保温容器内倒入57℃左右的热水，将砧木种子用纱网袋装好，置于50℃～52℃热水中预浸5～6分钟，取出后立即投入保温容器内处理50分钟，注意使水温保持在55℃±0.3℃。取出后立即摊开，稍晾干，放至温室待播。凡要接触已消毒种子的人员必须先用肥皂洗手。用于相橘无病毒苗圃的常用工具要专用，枝剪和嫁接刀在使用于每个品种材料之前，用1%次氯酸钟钠溶液消毒。

②播种：砧木种子播种于苗床营养土中，苗床保持地温25℃以上，相对湿度保持在80%～90%。当温度超过30℃时，立即揭膜和喷水降温。苗出土后每隔7～10天喷1次杀菌剂(多菌灵或托布津等），防治立枯病、炭症病和根腐病等。当苗高5厘米以上时开始追施0.1%～0.2%复合肥等稀薄液肥。

③砧木苗移栽：待苗高达15厘米以上时即可移栽。

④砧木苗的管理：移裁约15天后施1次稀薄液肥，以后每个月施肥1次。砧木苗生长期间要做好病虫防治工作。

(2)采穗母本树的培育与采穗

采穗母本树应当是经过农业部指定的鉴定机构鉴定，确认为无病才能应用。采穗母本树定植于网室内，竖立标示牌，加强水肥管理，注意促进营养生长，以培养较多的充实健壮接穗。定植后第2年开始采集接穗，采穗限期为3年。采穗工具应经过消毒处理。操作人员应当衣着干净，用肥皂洗手。

(3)嫁接

砧木苗高35厘米以上、主干10厘米高处的径粗达0.7厘米时即可嫁接。嫁接工具必须用洗衣粉洗净，再用10%～20%漂白粉消毒，用清水冲净后使用。嫁接人员用肥皂洗手，衣着干净。

(4)苗木出圃  

按照农业部行业标准《柑橘脱毒苗》的规定，出圃的无病苗木嫁接高度大于10厘米。苗木出圃时，对苗木的品种、砧木、嫁接日期、出圃时期、定植去向等情况进行详细记载。

3.茎尖嫁接脱毒育苗

茎尖嫁接脱毒育苗是目前脱毒育苗的先进技术。主要通过在无菌条件下茎尖嫁接实现脱毒。具体方法是：

(1)砧木准备  

将饱满的砧木种子剥去外种皮和内种皮，在0.5%次氯酸钠溶液加0.1%吐温-20的溶液中浸泡消毒10分钟，然后用无菌水冲洗3次，在无菌环境中播于含1%琼脂的MS植物细胞培养基(灭菌)的试管内，然后置于27℃±1℃下黑暗中培养。幼苗生长13～14天可用作茎尖嫁接的砧木。

(2)茎尖准备  

在纱网大棚内采母本树萌发的长1～3厘米的嫩梢，去掉叶片，切下尖端长约1厘米的梢段，在0.25%次氯酸钠溶液加0.1%吐温-20的溶液中浸泡消毒5分钟，用无菌水冲洗3次。在无菌环境中，在双目解剖镜下，用刀将下部叶去掉，切下生长点带2～3个叶原基的茎尖，长度为0.14～0.18毫米的茎尖备用。

(3)嫁接方法

在无菌条件下，从试管中取出砧木苗，截顶，留1.5厘米长的茎，留根4～6厘米长，去子叶和腋芽。在双目解剖镜下于砧木近顶部一侧开方形切口，即横切1刀、竖切2刀，或在茎段上部用3刀切成一个“△”切口，深达形成层，挑去3刀间皮层，将茎尖置于砧木切口，茎尖切面与砧木的横切面相贴，即完成嫁接。

(4)茎尖嫁接小苗管理  

将嫁接苗放人盛有液体培养基的试管内生长。培养温度27C，光照度000，每天16小时。

(5)茎尖嫁接植株的培养  

一般茎尖嫁接苗培养1个月， 长出2～3片叶片，叶色变为深绿色后即可移出转接。茎尖苗经过指示植物检测或通过聚合酶链式反应(PCR)检测，属无病苗，则可作为母树进入无病毒良种库用作采穗，再进入良种繁育场繁育无病苗木。

编辑：孙苑琪