“试管baby”的第一个守护者都在做什么？

1978年7月25日，世界上第一例试管婴儿出生，开启了辅助生殖技术的新篇章。胚胎学家是“试管baby”的第一个守护者，因此每年的7月25日定义为“胚胎学家日”。准爸妈将精、卵交给胚胎学家，胚胎学家精心呵护，神秘操作，让“试管baby”在温馨的大集体环境下健康发育。想不想知道胚胎学家一天的工作内容吗？分别在什么时段做哪些神秘操作吗？我们一起来看看吧。

7:20 胚胎实验室质控

一年之计在于春，一天之计在于晨，早晨是一天最美的开始。为了给“试管baby”好的开始，所以胚胎学家在早晨就检查“试管baby”的生活环境和条件是不是最舒适的，也就是胚胎实验室质控。质控内容主要包括胚胎实验室温度、湿度、环境（VOCs、氧气含量、微粒及细菌等），培养箱质控（温度、湿度、CO2及O2含量等），操作台温板温度、冰箱温度，液氮罐液氮量及温度，试剂和耗材批次等。1～2位胚胎学家到胚胎实验室后，对以上质控内容进行检测，胚胎实验室温度在24～26℃，湿度在40%～60%；二氧化碳培养箱温度37℃，CO2浓度为6%，O2浓度为5%；操作台温板温度控制在37～38℃等，若发现以上条件不满足，应及时调整，给“试管baby”一个温暖舒适的培养环境，确保胚胎能够健康发育。

7:40 IVF 取卵后第一天（D1） 剥蛋

IVF受精是将精卵放在培养皿中自由结合。精卵结合过程会将卵丘复合体中放射冠的卵丘细胞消化，而外围的颗粒细胞还紧紧裹在卵子上。胚胎学家需要用略大于卵子直径的剥卵针反复吹洗卵子，确认卵子周围的颗粒细胞脱落，便于显微镜下原核的观察。

8:00 胚胎及受精观察

精卵受精（D1）、第三天（D3）卵裂期胚胎发育、囊胚期（D5或D6）胚胎发育情况都需要在特定的时间去观察，便于评估胚胎发育的时空性，选择优质胚胎进行冷冻或移植。受精后17～20小时，D1在倒置显微镜下观察原核判断精卵受精，同时出现两原核，两极体的受精卵视为正常受精，转入G-1培养液中继续培养。若出现3个原核，视为异常受精，直接丢弃；出现1个原核，在IVF周期中，会继续培养，观察后续胚胎发育情况，若在卵泡浆内单精子注射（ICSI)周期中出现1个原核，将直接丢弃。除了判断精卵受精情况，还会从原核在卵子中位置、两原核相对位置、原核中核仁数目、空间分布等对原核进行评分。正常受精的受精卵在G-1中继续培养至D3，通过卵裂球分裂速度、卵裂球数目、碎片程度来评分D3天胚胎，选择优质胚胎要么置入G-2培养液中继续培养至囊胚，要么冷冻，要么移植。若患者在D3选择继续囊胚培养，则需要在D5或D6观察囊胚情况，通过扩张程度、内细胞团细胞数目、滋养层细胞数目来对囊胚进行评分，选择优质的囊胚行冷冻保存或移植，其余胚胎丢弃。

8:00 捡卵

捡卵用的G-MOPS-PLUS磷酸缓冲系培养基提前30分钟37℃，无CO2的培养箱预热。医生在B超引导下吸出卵泡液，胚胎学家将卵泡液迅速转移至培养皿中，并在体视显微镜下观察卵丘复合体，捡出卵丘复合体并依次用G-MOPS-PLUS清洗两次，再用G-IVF清洗一次，并放入提前平衡好的G-IVF培养液中，于37℃，6%的CO2，5%的O2的培养箱中培养，备用。

8:30 ，13:30 复苏

胚胎学家早晨到胚胎实验室后，准备复苏所用的复苏液（包括TS DS WS1 WS2），其中TS 在37℃、无CO2的培养箱预热30分钟，其余三种复苏液室温平衡30分钟，8:30开始上午复苏操作。本中心上午复苏患者基本都是上午复苏，培养至下午的囊胚移植，所以建议患者尽量在8:30之前到达中心完成验证工作，避免影响后续的培养及移植。下午13:30还有少部分患者复苏D3卵裂期胚胎。

8:30，13:30 移植

8:30，13:30 都可以开始移植，移植为什么两个时间，有区别吗？8:30移植都是包含新鲜移植、D3胚胎移植及D3胚胎复苏并囊胚培养的移植等。13:30移植主要是上午复苏，体外培养2小时以上的囊胚移植。

9:30 ICSI D0 剥蛋

8:00开始采卵，其中ICSI周期的患者卵丘复合体取出后，在G-IVF中培养1～2小时后，可行剥卵操作，胚胎学家常称之为“剥蛋”。剥蛋就是用一定浓度的透明质酸酶消化卵丘复合体，用略大于卵子直径的剥卵针反复吹洗卵子，剥离卵丘细胞和颗粒细胞。剥蛋后，胚胎学家需在显微镜下观察卵子中是否含有第一极体，若有第一极体，卵子为成熟卵子（MII）并置于G-IVF微滴中继续培养，下午13:30行ICSI操作。卵子中若无第一极体，即为不成熟卵子（MI、GV），将其丢弃。

9:45 冷冻

7:40胚胎观察后，胚胎学家将D3、D5、D6中的优质胚胎情况反馈给临床医生。临床医生会依据患者个体化情况、患者自己意愿，选择优质胚胎的去向：冷冻、移植或囊胚培养，随后医生将医嘱交回胚胎学家，胚胎学家遵医嘱，对优质胚胎行冷冻保存操作。

10:00 换液

胚胎学家将D3的优质胚胎情况反馈给临床医生。临床医生会依据患者个体化情况、患者自己意愿，决定优质胚胎是否继续囊胚培养。胚胎学家遵囊胚培养的医嘱，对优质胚胎行换液操作，即将优质胚胎从G-1培养液中置换到G-2培养液中，于37℃，6%的CO2，5%的O2的培养箱中培养2～3天。

10:00 活检

植入前胚胎遗传学筛查/诊断主要用于单基因病、反复移植失败、反复流产、高龄等患者，随着活检和遗传学分析技术的进步，此类患者的周期比例也逐渐增高。目前胚胎学家主要的活检技术是囊胚滋养层细胞活检技术，即利用显微操作仪吸取3～5个滋养层细胞，用于单细胞测序分析染色体数目、结构等。胚胎活检后行全胚冷冻，待活检结果出来后，选择正常的胚胎进行移植。

11:20 体外受精（IVF）

HCG注射后38～40小时，是胚胎学家IVF授精时机。胚胎学家将处理好的卵子和精子按照一定比例混合培养，让精卵自由组合，完成IVF授精过程。

13:30 ICSI

ICSI周期的单精子注射卵子的操作从13:30开始， 通过显微操作系统，将单个精子注入卵子。ICSI结束后，直接将注入精子后的MII卵子移入G-1培养液中，于37℃，6%的CO2，5%的O2的培养箱中培养，待D1原核观察。

16:30 捞蛋、早剥

IVF受精4～6小时，胚胎学家会捞蛋和早剥，其目的一是依据第二极体是否排出，判断精卵受精情况；二是改善精卵的培养环境。若患者为原发不孕、第一IVF周期，则会早剥2～3个卵子，如果出现1～2个卵子出现双极体，则说明受精情况良好。若受精情况不好，则会于18:00再次观察受精情况，无改善立即行进行补救ICSI。

13:30 配液、培养皿上贴每位患者专用标签

卵子受精、培养，胚胎培养所用的培养液都应37℃，6%的CO2培养箱中平衡8小时以上，因此应提前配制第二天采卵、胚胎培养所用的培养液。除了配制平衡培养所用液体，还应在每个培养皿上贴上患者门诊号所对应的芯片和核对条码，便于操作时的核对。

除以上工作外，胚胎学家还有病历登记的信息书写及记录，各种质控、胚胎实验室数据的录入，实验仪器设备的维护等等。在幕后默默照顾“试管baby”的胚胎学家，为每一个受精卵及胚胎保驾护航，双手捧起“试管baby”，承载了生命的起点。

来源: 试管婴儿“守护者”