甲同学：从外貌就能区分，像头发长短、个子高低和身材外形等都可以的。

         老师：现在有的男的头发比女同志还长，不光长，还打卷；说到高矮，女性比男性高也不是什么新鲜事儿；再有一些男的看身材，比女性还柔美，论服饰比女性还花哨，有的甚至还要喷上点香水。所以，你说的恐怕行不通。

         乙同学：专业点儿讲，还是要看第二性特征，比如喉结和胡须。

         老师：但是，不少男性喉结也不明显，没胡须的男性大把大把的。

         学霸：要看染色体的，带Y的就是男性。

         ……

         面对活跃的课堂气氛，老师适时点评说：还是学霸厉害，一锤定音。但是，轮到微生物情况就发生变化了。首先，微生物同动物不同，不能以雌雄进行区分。其次，微生物种类之多，远超人们的预期。有种说法是，现在人类发现的微生物种类之和，可能仅仅是自然界全部微生物种类的1%-10%。随后，话锋一转，引出了此次课程的重点——细菌分类研究中最为常用的革兰氏染色法。

          革兰氏染色法于1884年由丹麦的革兰（全名：汉斯·克里斯蒂安·约阿希姆·革兰，享年85岁）医生所创立，是众多鉴别细菌方法之中应用最为广泛的一种染色法。不同种属的细菌，会呈现紫色和红色两种染色结果。染色结果为紫色的，称之为革兰氏阳性细菌，而红色的就是革兰氏阴性细菌了。这里的阴阳，与通常人们所说的雌雄、男女和公母的意义不同，仅仅是细菌分类上的一个指标（“阳性”译自英文Positive，“阴性”译自Negative）。实际上，将其称之为革兰氏染色阳/阴性反应细菌更为恰当。

         有了上述概念之后，再来了解下革兰氏染色的实验步骤和方法原理。整个流程包括四个步骤，依次为初染 → 媒染 → 脱色 → 复染。初染所用试剂主要是草酸铵结晶紫（呈紫色），媒染要用到碘液，常用脱色剂为95%的酒精溶液（纯乙醇不行），而复染则涉及蕃红或沙黄（二者皆为红色燃料）染液。整个实验的关键环节为第三步（脱色），其中酒精洗脱时间的长短更是重中之重。革兰氏染色法之所以能够将细菌进行区分，是利用了不同细菌细胞壁构成上存在的差异。

                                                    图1、革兰染色法

         一般而言，阳性细菌同阴性细菌相比，细胞壁更为厚实，脂含量低，透性屏障（肽聚糖层）厚且胶联度高。细菌经初染和媒染之后，其细胞壁中便会出现结晶紫和碘的复合物，而这种复合物是水不溶性的。到了脱色步骤，阳性细菌遇到酒精时因其细胞壁厚实，肽聚糖层紧实，且脂含量低，上述复合物会嵌留在细胞壁内，并因此使菌体呈紫色（实际为紫中带红，参见图1）。与之相对，阴性细菌遇到脱色剂后，水不溶性复合物会出现洗脱现象（此时菌体为无色），后经复染，菌体便被染为红色了（如图2所示）。

                                     图2、革兰氏阳性细菌显微照（无乳链球菌）

                                    图3、革兰氏阴性细菌显微照（人苍白杆菌）

         一般而言，有芽胞（一种细菌休眠体）的杆菌和绝大多数球菌，以及所有的放线菌都属革兰氏阳性细菌，而弧菌、螺旋体，以及大多数致病且无芽胞的杆菌则多为革兰氏阴性细菌。人们常听闻的阳性细菌主要有芽孢杆菌、葡萄球菌、炭疽杆菌、肺炎双球菌和链球菌等，而阴性细菌则包括大肠杆菌、假单胞菌、伤寒杆菌、霍乱弧菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌和百日咳杆菌等。从医学角度来看，大多数革兰氏阳性细菌都对青霉素敏感，而革阴性细菌则对氯霉素和链霉素等抗生素敏感，对青霉素不敏感。由此可知，革兰氏染色法除细菌分类之用，在抗生素研发等活动中也是有用武之地的。

-END-

本文为《胖魔王的微生物阵地》首发，任何媒体转载时须保留《胖魔王的微生物阵地》名称及微信号。未经许可，严禁对包括标题在内的任何改动。

文中图片大部分引自网络，如不慎侵权请告知。欢迎朋友们就内容进行斧正，一切为了更好的科普。

来源: 胖魔王的科普阵地