DBB stain test,用于酵母菌鉴定中的一种染色方法。又称重氮蓝B盐染色试验或固蓝盐B染色试验。本试验可用于鉴别子囊菌酵母和担子菌酵母,前者经DBB染色后,菌落都不染色,为负反应,而后者的菌落却可被染成桔红色,属正反应。

简介用于酵母菌鉴定中的一种染色方法。又称重氮蓝B盐染色试验或固蓝盐B染色试验。本试验可用于鉴别子囊菌酵母和担子菌酵母,前者经DBB染色后,菌落都不染色,为负反应,而后者的菌落却可被染成桔红色,属正反应。1

步骤将试验菌接种在YM琼脂斜面上,25~28℃下培养2~3周。沿管壁滴加DBB显色液,只使斜面下半部浸泡在试剂中,并以未接触试剂的斜面上半部作对照,放置室温(约20℃)1~2min。凡菌落呈桔红色者为阳性,不显色者为阴性。对某些产类胡萝卜素的红酵母和红冬孢酵母,有时难以判断颜色变化,这时,可将菌株接种在小培养皿中,待形成巨大菌落后,再在菌落周围滴加试剂,直接观察菌落颜色的变化。1

配置D8B染色剂的配制:一、配制Tris-HCl缓冲液——按0.1mol/L的浓度称取Tris(2-氨基-2-羟基甲基丙烷-1,3-二醇)试剂,用蒸馏水定容至100ml,以浓HCl调节pH至7.0;二、分配制0.1%DBB溶液——称取100mg重氮蓝B盐溶于100ml Tris-HC1缓冲液中后即成。注意:DBB液必须现配现用,pH要准确,否则会影响灵敏度。1

本词条内容贡献者为:

李丽霞 - 博士 - 西北农林科技大学